內蒙古氨基嘧啶基于酶抑制法的酒精飲料中氨基甲酸乙酯的快速檢測的研究：

氨基甲酸乙酯是一種酒類及發酵食品在發酵與貯存過程中天然產生的致癌物，內蒙古氨基嘧啶目前國內外對其的檢測方法主要集中在儀器分析法，這些方法操作復雜、所用儀器昂貴、耗時長，故急需建立一種簡單、快速、準確的檢測方法。本論文基于酶抑制原理，研究利用分光光度法快速檢測酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量，主要包括以下幾個方面的內容： 1、選用Ellman法，在酶活力測定的pH、溫度和時間條件下，對乙酰膽堿酯酶的酶學性質進行研究，描述了乙酰膽堿酯酶的相應米氏動力學參數。研究氨基甲酸乙酯對乙酰膽堿酯酶的抑制作用，并用溴水（3%）-氫氧化鈉溶液對氨基甲酸乙酯進行預處理，使其對乙酰膽堿酯酶的抑制率得以顯著提高，且其抑制程度與濃度呈線性關系，線性范圍為1mg/L～7.5mg/L。 2、研究乙醇對乙酰膽堿酯酶酶活力的影響，并分析了在乙醇-水溶液、乙醇-緩沖液中乙酰膽堿酯酶的動力學參數變化。在乙醇濃度15%的乙醇-緩沖液體系中，對不同濃度氨基甲酸乙酯對酶活的抑制率進行測定，發現酶的抑制率與氨基甲酸乙酯濃度呈線性相關，內蒙古氨基嘧啶線性范圍在1～5mg/L到2～10mg/L之間。但在乙醇-水體系中酶的抑制率和氨基甲酸乙酯濃度間的線性關系不存在。初步嘗試采用XDA-1型大孔吸附樹脂對乙醇進行吸附，酒精度下降約3%～4%，吸附效果并不顯著。 3、利用對二甲氨基苯甲醛法，在酸的用量、顯色劑用量及溫度和時間的條件下，測定433nm處吸光度，結果表明吸光度與氨基甲酸乙酯濃度呈線性關系，線性范圍為0～1g/L，且方法精密度高。將對二甲氨基苯甲醛法與酶抑制法結合，結果表明，經Ehrlich反應后的氨基甲酸乙酯對乙酰膽堿酯酶無抑制作用。 4、對廣州市場銷售的中低端酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進行了分析調查，發現除啤酒、米酒外，各種酒精飲料中都含有一定濃度的氨基甲酸乙酯，但含量各不相同，平均含量大小依次為白蘭地梅酒黃酒白酒藥酒果酒葡萄酒，其中白蘭地和梅酒中氨基甲酸乙酯含量非常高，部分酒樣高達2.0846mg/kg、0.7504mg/kg。采用酶抑制法對酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進行快速檢測，結果表明，直接完全地應用酶抑制法目前尚不完善，可利用固相萃取結合酶抑制法，內蒙古氨基嘧啶對酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進行定性分析。